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详细解析高通量紫外分光光度计的使用方法

发布时间:2022-11-27      点击次数:121
  高通量紫外分光光度计在吸收光微孔板测读器领域宣告了一场变革。利用一个分光计能够在200-1000nm全光谱范围内以低于1秒/孔进行测读,并且样品量可低至2ul。适用所有标准微孔板(包括1536孔板)。分光计的测读速度,简易的按钮式操作,程序设计和储存功能使用户能根据需要灵活优化所有吸光实验的设定。 
 

 

  它的基本原理:
  分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
  朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即A= kcl
  式中比例常数k与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关;c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。
 
  高通量紫外分光光度计的使用说明:
  1、开机:
  打开样品室盖,检查样品室中是否放置遮光物,若有取出。打开电源开关,仪器进入预热状态,预热20min。
  2、选择光源:
  电源开关打开后,钨灯即亮;若仪器需要在紫外光区工作,则需将光源切换至氘灯;若仪器需要在紫外光区工作,则要同时点亮氘灯和钨灯。
  3、选择波长:
  调节波长旋钮或输入实验所需的波长,选择须用的单色光波长。
  4、校准:
  目前型号较新的分光光度计具有开机自动校准功能,无自动校准功能的设备使用前需参照使用说明书手动校准。
  5、测量:
  如试验方法中无特别规定,通常使用装有蒸馏水的吸收池调零后放入样品和参比样进行测试,并记录测试结果。
  6、数据处理:
  定量测试时通常需要先测定若干个已知浓度的待测物标准样品,根据其吸光值与浓度绘制标准曲线。目前高通量紫外分光光度计本身都有制作和计算标准曲线的功能,具体操作方式可参照设备使用说明。不具备标准曲线绘制功能的设备,可利用Excel软件或坐标纸辅助绘制。
  7、关机:
  测量完毕,取出吸收池,清洗并晾干后入盒保存。关闭电源,拔下电源插头,在样品室内放入干燥剂,盖上样品室盖,罩上防尘罩。
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